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神經(jīng)元原代培養(yǎng)是將胚胎哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等腦組織直接取出,再接種培養(yǎng)的方法。目前國內(nèi)、外有關(guān)神經(jīng)元培養(yǎng)的方法較多,但在原代培養(yǎng)中神經(jīng)元的純度和產(chǎn)量方面還存在一些急待解決的問題。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細胞,相對于其它細胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。
transwell侵襲需在聚碳酸酯膜上側(cè)鋪一層基質(zhì)膠,用以模仿細胞外基質(zhì),細胞必須分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)要把基質(zhì)消化了才能進入下室(這與體內(nèi)情況較為相似),最后通過計算進入下室的細胞量即可反應(yīng)細胞的侵襲能力
穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建穩(wěn)定表達的細胞株,指基于某一細胞系構(gòu)建的持續(xù)過表達或干擾某特定基因的細胞系。
準備材料和試劑。需要準備培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)用具、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)室等。提取內(nèi)皮細胞,這可以通過胸腔抽取心臟或通過血管組織分離法獲取。實驗環(huán)境需保持干凈、無菌。
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