簡(jiǎn)要描述:采用氧糖剝奪(OGD,Oxygen-Glucose Deprivation)方法建模將HL-1心肌細(xì)胞缺血缺氧處理
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采用氧糖剝奪(OGD,Oxygen-Glucose Deprivation)方法建模
將HL-1心肌細(xì)胞缺血缺氧處理:棄去細(xì)胞正常培養(yǎng)液,PBS清洗2-3遍,向培養(yǎng)板中加入含無(wú)糖無(wú)血清的DMEM培養(yǎng)液(自購(gòu),缺氧之前將正常DMEM培養(yǎng)基放人三氣培養(yǎng)箱中用95%N2和5%O2平衡30min,降低培養(yǎng)基中氧的含量)。將細(xì)胞置于事先已通氣95% N2、5% CO2或94% N2、1% O2、5% CO2的缺氧裝置中,進(jìn)行缺氧處理。
恢復(fù)培養(yǎng):OGD處理6h后,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至含有HL-1細(xì)胞培養(yǎng)基的正常條件下(37°C、5% CO?)繼續(xù)培養(yǎng)。
對(duì)照組(Control Group):對(duì)照組細(xì)胞沒(méi)有接受OGD處理,僅在常規(guī)培養(yǎng)條件下(37°C、5% CO?,含血清培養(yǎng)基)進(jìn)行培養(yǎng),以保持正常生長(zhǎng)狀態(tài)。
A. MSC鏡下圖 | B. HL-1鏡下圖 | C. OGD后HL-1鏡下圖 |
E. OGD后MSC與HL-1共培養(yǎng)鏡下圖 | F. OGD/R12h后MSC與HL-1共培養(yǎng)鏡下圖 |
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