簡要描述:chip蛋白實驗技術(shù)服務(wù)研究蛋白質(zhì)和DNA在染色質(zhì)環(huán)境下的相互作用是闡明真核生物基因表達機制的基本途徑
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品牌 | 其他品牌 | 產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
chip蛋白實驗技術(shù)服務(wù)
上海伊萊博生物科技有限公司成立于2005年,公司位于上海長江軟件園,實驗室面積600多平方米。公司目前具備較好的的生物學、醫(yī)學技術(shù)服務(wù)平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。
chip蛋白實驗技術(shù)服務(wù)操作流程:
1 、樣品準備與交聯(lián)
細胞收集后,用37%的formaldehyde處理細胞,交聯(lián)核酸與DNA結(jié)合蛋白;
2. 超聲打斷染色質(zhì)
裂解細胞,用Bioruptor將染色質(zhì)超聲破碎成200-1000bp片斷;將片段分為兩份,一份用于免疫共沉淀,一份用于對照。
3 、免疫共沉淀 (IP)
取B步驟所得一份片斷與ChIP特異抗體結(jié)合進行免疫共沉淀,利用免疫磁珠法富集抗體復(fù)合物。
4 、解交聯(lián)及純化 DNA
將富集的DNA/蛋白復(fù)合物解交聯(lián)釋放DNA的片段,并進行純化(IP DNA);B步驟所得用于對照(Input DNA)的片斷作不進行IP實驗,但也要解交聯(lián)并純化。
5 、 DNA 段 PCR 擴增
針對ChIP DNA, Input DNA及對照DNA的目的片段設(shè)計特異性引物并進行熒光定量PCR擴增。
6 、結(jié)果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
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