1. 體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠,用5% 異氟醚深度麻醉小鼠,然后2.5% 異氟醚維持麻醉。
2. 在頸部中線(xiàn)切開(kāi)一個(gè)切口。
3. 分離右側(cè)的頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)。
4. 右側(cè)的頸總動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎。
5. 分離右側(cè)的頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,右側(cè)的頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎;右側(cè)的頸外動(dòng)脈頭端結(jié)扎,近心端掛線(xiàn)備用。
6. 隨后,用無(wú)菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動(dòng)脈上做一個(gè)小洞,然后插入線(xiàn)栓,近心端掛線(xiàn)適度的系牢插入右側(cè)頸外動(dòng)脈的線(xiàn)栓,以防止血從小洞中流出;松開(kāi)右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)的結(jié)扎線(xiàn),輕輕送入線(xiàn)栓到大腦中動(dòng)脈,當(dāng)感覺(jué)到阻力時(shí)停止,系牢線(xiàn)栓。
7. 縫合皮膚。
線(xiàn)栓法阻斷大腦中動(dòng)脈的方案
8. 60min后,線(xiàn)栓輕輕從大腦中動(dòng)脈移出,系牢頸外動(dòng)脈結(jié)扎線(xiàn);然后松開(kāi)右側(cè)頸總動(dòng)脈暫時(shí)的結(jié)扎線(xiàn),小鼠進(jìn)行再灌注。
9. 48h后神經(jīng)功能評(píng)分,Garcia評(píng)分。
1).自發(fā)性活動(dòng);
2).四肢運(yùn)動(dòng)的對(duì)稱(chēng)性;
3).前爪伸展;
4).爬行;
5).身體本體感覺(jué);
6).觸須反應(yīng)。
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