動(dòng)物:
7周雌性SD大鼠,重量 147±12g。
建模:
Ⅱ型膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(typeⅡ collagen-induced arthritis,CIA)模型是一種人類類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的常見病理模型。建立CIA大鼠模型的方法如下:10mg雞Ⅱ型膠原溶解于5ml 0.1mol/L乙酸中混合均勻,溶液為2mg/ml。然后將溶液儲(chǔ)存在4℃保存一晚上。第二天,用2ml注射器,抽取0.7ml膠原,再用另一支2ml注射器吸入0.7ml不完quan弗氏液佐劑。在冰袋上,同時(shí)從兩個(gè)注射器中取下針頭,連接到三通上;關(guān)閉一個(gè)接口,允許兩個(gè)注射器相通。使用注射器在冰袋上來回推30分鐘,使兩個(gè)注射器中的溶液充分混合成乳白色。如果生成的乳液無法分散在清水中時(shí),1 mg/ml膠原乳液的制備可認(rèn)為完成。在大鼠尾根,膠原乳劑(0.1ml)在2-3 cm的距離處皮下注射。在初次免疫后一周,將相同劑量的膠原乳液注射到這些大鼠身上相同的區(qū)域。
模型評(píng)估:
從第二次免疫當(dāng)天開始,大鼠每隔一天進(jìn)行臨床檢查以評(píng)估嚴(yán)重程度。模型大鼠足爪評(píng)分如下:0分沒有宏觀的紅斑和腫脹的證據(jù);1分紅斑和輕度軟組織腫脹局限于跗骨/踝關(guān)節(jié);2分從踝關(guān)節(jié)到跗骨,紅斑和輕度軟組織腫脹; 3分紅斑和中度軟組織腫脹從踝關(guān)節(jié)延伸的到跗骨; 4分明顯紅斑和嚴(yán)重腫脹(包括踝關(guān)節(jié)、足底面和腳趾)或四肢強(qiáng)硬。
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